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緑色蛍光タンパク /Green Fluorescent Protein (GFP)

GFP_1.jpg緑色蛍光タンパク(Green Fluorescent Protein;GFP)は、 オワンクラゲ(Aequorea victoria)から単離される蛍光タンパク質の一種。

  • 用途・歴史

ノーベル賞学者・下村脩らによってオワンクラゲから1962年に単離・精製される。[1]

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(写真:Wikipediaより引用)
分子量は約27 kDaであり、238のアミノ酸から構成されている。 三次元構造は、1996年にX線結晶構造解析法によって解析されている[2]。 冒頭図のように11のβシート単位が螺旋状に組織化し、発色団(白色部分)を包む形で円筒構造が組まれている。この筒状構造は、外部要因から発色団を守って発光効率と寿命を向上させる、バリアー的な役割も果たしているとされる。

オワンクラゲの体内では、カルシウム応答型タンパクイクオリン(aequorin)とセットで発光する。すなわち、イクオリンがまずエネルギーを吸収し、放出された青色蛍光をGFPが受け取って緑色に光る。

GFPの発光団は近紫外光(397nm)を吸収し、緑色可視光(509nm)を放出する。発色団はSer65-Tyr66-Gly67の3アミノ酸残基が環化・酸化を起こし、自発的に形成される。この環化反応は、通常は起こりにくいが、コンフォメーションが適切な配置をとっているため、GFPにおいては特別に進行しやすくなっている。

GFP_3.gif 同じくノーベル賞学者のChalfie・Tsienらによって生命現象追跡ツールとしての可能性が示され、爆発的に普及した。

具体的な応用例などについては、有機って面白いよね!「2008年ノーベル化学賞」を参照。

 

  • 関連文献

[1] 1] Shimomura, O. et al. J. Cell. Comp. Physiol. 1962, 59, 223. doi:10.1002/jcp.1030590302
[2] (a) Tsien, R. Y.; Prasher, D. et al. Science 1996, 273, 1392. DOI: 10.1126/science.273.5280.1392 (b) Phillips, G. N. Jr. Nat. Biotechnol. 1996, 14, 1246. doi:10.1038/nbt1096-1246
[3]  Nienhaus, G. U. Angew. Chem. Int. Ed. EarlyView. doi:10.1002/anie.200804998

  • 関連書籍

 

くらげのふしぎ (知りたい★サイエンス)
技術評論社
発売日:2006-08-05
おすすめ度:5.0
おすすめ度5 オワンクラゲの発光物質
GFPとバイオイメージング―蛍光タンパク質の発現と検出の基本から生体機能の可視化まで (ポストゲノム時代の実験講座)
羊土社
宮脇 敦史(編集)
発売日:2000-10
おすすめ度:3.5
おすすめ度3 not brilliantly flurescent
おすすめ度4 これから始める人
  • 関連リンク

 2008年ノーベル化学賞 (有機って面白いよね!)

オワンクラゲ - Wikipedia

緑色蛍光タンパク - Wikipedia

Green Fluorescent Protein - Wikipedia

Fluorescent Proteins - Scholarpedia

GFP利用の遺伝子組み換え生物、画像ギャラリー(WIRED VISION)

Green Fluorescent Protein

Nobel Prize in Chemistry 2008

http://www.lifesci.ucsb.edu/~biolum/

Green Fluorescent Protein (Protein Data Bank)

Introduction to Fluorescent proteins

Milestone paper of Fluorescent Proteins (Nature.com)

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2009年1月10日 cosine |